主營產(chǎn)品:
生化試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品,PCR試劑盒,?核酸檢測試劑盒,熒光定量檢測試劑盒,生化試劑盒?,比色法試劑盒,酶活性檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯(lián)免yi檢測試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測試劑盒,細(xì)胞株,原代細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)基,標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
PCR的特異性影響因素供參考
日期:2024-12-26 04:20
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摘要:
許多因素可以影響PCR的特異性,在此我們作一歸納,供大家參考:
1、退火步驟的嚴(yán)格性:提高退火溫度可以減少不匹配的雜交,從而提高特異性。
2、減短退火時(shí)間及延伸時(shí)間可以減少錯(cuò)誤引發(fā)及錯(cuò)誤延伸。
3、引物二聚體是常見的副產(chǎn)品,降低引物及酶的濃度也可以減少錯(cuò)誤引發(fā),尤其是引物的二聚化。
4、改變mgcl2(有時(shí)kcl)濃度可以改進(jìn)特異性,這可能是提高反應(yīng)嚴(yán)格性或者對(duì)taq酶的直接作用。
一般認(rèn)為PCR產(chǎn)物應(yīng)在48h以內(nèi)完成電泳檢測,有些好于當(dāng)日電泳檢測,大于48h后帶型就會(huì)出現(xiàn)不規(guī)則,甚至...
許多因素可以影響PCR的特異性,在此我們作一歸納,供大家參考:
1、退火步驟的嚴(yán)格性:提高退火溫度可以減少不匹配的雜交,從而提高特異性。
2、減短退火時(shí)間及延伸時(shí)間可以減少錯(cuò)誤引發(fā)及錯(cuò)誤延伸。
3、引物二聚體是常見的副產(chǎn)品,降低引物及酶的濃度也可以減少錯(cuò)誤引發(fā),尤其是引物的二聚化。
4、改變mgcl2(有時(shí)kcl)濃度可以改進(jìn)特異性,這可能是提高反應(yīng)嚴(yán)格性或者對(duì)taq酶的直接作用。
一般認(rèn)為PCR產(chǎn)物應(yīng)在48h以內(nèi)完成電泳檢測,有些好于當(dāng)日電泳檢測,大于48h后帶型就會(huì)出現(xiàn)不規(guī)則,甚至消失。